Открыть меню

Липаза, активируемая солями желчных кислот: ингибирование фосфолипидами и реактивация под действием фосфолипазы А2


ВВЕДЕНИЕ

Липазу, активируемую солями желчных кислот (BSSL; номер Комиссии по ферментам (КФ) 3.1.1.13) изучали на предмет улучшения ферментативной терапии недостаточности поджелудочной железы. Однако препарат был практически неэффективным. Мы сделали предположение, что, по аналогии с панкреатической липазой, BSSL ингибируется фосфолипидами, и это ингибирование можно снять фосфолипазой A2 (PLA2; КФ 3.1.1.4), и провели исследование для проверки этого предположения.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:

В качестве модели пищеварительной среды кишечника использовали синтетические эмульсии мицелл триглицеридов и фосфатидилхолина (ФХ) или лизофосфатидилхолина (ЛФХ)/солей желчных кислот. Изучали влияние PLA2 на активность BSSL в эмульсии с ФХ. Для измерения степени липолиза и идентификации его продуктов использовали автоматическое титрование при постоянном значении рН (pH-stat) и спектроскопию ядерного магнитного резонанса (ЯМР).

РЕЗУЛЬТАТЫ:

ФХ ингибировал BSSL при любой концентрации, а ЛФХ — только при отношении концентраций ЛФХ/солей желчных кислот выше 0,3. PLA2 реактивировала фермент только при вышеуказанном отношении ниже 0,3, несмотря на полный гидролиз фосфолипидов. То есть ЛФХ оказывает ингибирующее действие в более высоких концентрациях.

ВЫВОДЫ:
Полученные результаты могут лечь в основу модифицированной ферментативной терапии экзокринной недостаточности поджелудочной железы. Применение BSSL вместе с PLA2 позволяет улучшить состояние пациентов благодаря коррекции концентраций фосфолипидов и лизофосфолипидов в кишечном соке.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА:

Липаза, активируемая солями желчных кислот; муковисцидоз; ферментативная терапия; ЯМР-спектроскопия; недостаточность поджелудочной железы; титрование ферментов

АВТОРЫ

Venuti E1, Shishmarev D2, Kuchel PW2, Dutt S1, Blumenthal CS3, Gaskin KJ4.

Author information
  1. James Fairfax Institute of Paediatric Nutrition, The Children’s Hospital at Westmead, NSW 2145, Australia.
  2. The University of Sydney, School of Life and Environmental Sciences, NSW 2006, Australia.
  3. Women’s and Newborn Health, Westmead Hospital, NSW 2145, Australia.
  4. James Fairfax Institute of Paediatric Nutrition, The Children’s Hospital at Westmead, NSW 2145, Australia. Electronic address: kevin.gaskin@health.nsw.gov.au.

J Cyst Fibros. 2017 Nov;16(6):763−770.
doi: 10.1016/j.jcf.2017.07.005. Epub 2017 Jul 22.

Bile salt stimulated lipase: Inhibition by phospholipids and relief by phospholipase A2.

Abstract

INTRODUCTION:

Bile salt stimulated lipase (BSSL; Enzyme Commission (EC) number 3.1.1.13) has been a candidate triglyceridase for improving enzyme therapy for pancreatic insufficiency; however, its efficacy is near absent. We hypothesise that similarly to pancreatic lipase, BSSL is inhibited by phospholipids and this inhibition is relieved by Phospholipase A2 (PLA2; EC 3.1.1.4), and the present study was undertaken to explore this possibility.

MATERIALS AND METHODS:

Synthetic emulsions of triglyceride and phosphatidylcholine (PC) or lysophosphatidylcholine (LPC)/bile salt mixed micelles were used as a model of intestinal digestion-media. The effect of PLA2 treatment of systems containing PC on BSSL activity was also explored. Automatic titration at constant pH (pH-stat) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy were used to measure the rate and identify products of lipolysis.

RESULTS:

PC was inhibitory to BSSL activity, while LPC became inhibitory only above an LPC/bile salt concentration ratio of 0.3. PLA2treatment relieved the inhibition only below this ratio, despite its complete phospholipid-hydrolysing action. Thus, LPC had an inhibitory effect at higher concentrations.

CONCLUSIONS:
Полученные результаты могут лечь в основу модифицированной ферментативной терапии экзокринной недостаточности поджелудочной железы. Применение BSSL вместе с PLA2 позволяет улучшить состояние пациентов благодаря коррекции концентраций фосфолипидов и лизофосфолипидов в кишечном соке.
Copyright © 2017 European Cystic Fibrosis Society. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.

KEYWORDS:

Bile salt stimulated lipase; Cystic fibrosis; Enzyme therapy; NMR spectroscopy; Pancreatic insufficiency; Titrimetric enzyme assay

© 2021 Гастрошколы · Копирование материалов сайта без разрешения запрещено · Политика конфиденциальности
Дизайн и поддержка: GoodwinPress.ru