Липаза, активируемая солями желчных кислот: ингибирование фосфолипидами и реактивация под действием фосфолипазы А2
ВВЕДЕНИЕ
Липазу, активируемую солями желчных кислот (BSSL; номер Комиссии по ферментам (КФ)
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
В качестве модели пищеварительной среды кишечника использовали синтетические эмульсии мицелл триглицеридов и фосфатидилхолина (ФХ) или лизофосфатидилхолина (ЛФХ)/солей желчных кислот. Изучали влияние PLA2 на активность BSSL в эмульсии с ФХ. Для измерения степени липолиза и идентификации его продуктов использовали автоматическое титрование при постоянном значении рН (pH-stat) и спектроскопию ядерного магнитного резонанса (ЯМР).
РЕЗУЛЬТАТЫ:
ФХ ингибировал BSSL при любой концентрации, а ЛФХ — только при отношении концентраций ЛФХ/солей желчных кислот выше 0,3. PLA2 реактивировала фермент только при вышеуказанном отношении ниже 0,3, несмотря на полный гидролиз фосфолипидов. То есть ЛФХ оказывает ингибирующее действие в более высоких концентрациях.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА:
Липаза, активируемая солями желчных кислот; муковисцидоз; ферментативная терапия; ЯМР-спектроскопия; недостаточность поджелудочной железы; титрование ферментов
АВТОРЫ
Venuti E1, Shishmarev D2, Kuchel PW2, Dutt S1, Blumenthal CS3, Gaskin KJ4.
J Cyst Fibros. 2017 Nov;16(6):763−770.
doi: 10.1016/j.jcf.2017.07.005. Epub 2017 Jul 22.
Bile salt stimulated lipase: Inhibition by phospholipids and relief by phospholipase A2.
Abstract
INTRODUCTION:
Bile salt stimulated lipase (BSSL; Enzyme Commission (EC) number
MATERIALS AND METHODS:
Synthetic emulsions of triglyceride and phosphatidylcholine (PC) or lysophosphatidylcholine (LPC)/bile salt mixed micelles were used as a model of intestinal digestion-media. The effect of PLA2 treatment of systems containing PC on BSSL activity was also explored. Automatic titration at constant pH (pH-stat) and nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy were used to measure the rate and identify products of lipolysis.
RESULTS:
PC was inhibitory to BSSL activity, while LPC became inhibitory only above an LPC/bile salt concentration ratio of 0.3. PLA2treatment relieved the inhibition only below this ratio, despite its complete phospholipid-hydrolysing action. Thus, LPC had an inhibitory effect at higher concentrations.
KEYWORDS:
Bile salt stimulated lipase; Cystic fibrosis; Enzyme therapy; NMR spectroscopy; Pancreatic insufficiency; Titrimetric enzyme assay